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慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞诱导特异性T淋巴细胞应答
发布时间: 2006-01-02    人气指数:1890

北京大学人民医院肝病研究所

李若冰  陈红松  谢尧  费然  丛旭  范春蕾  王松霞  魏来  王宇

【摘要】  

    目的  探讨慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(DC)是否诱导特异性T细胞应答。 

    方法  (1)将研究对象分为慢性乙型肝炎患者组、急性乙型肝炎痊愈组、健康志愿者组,分离各组研究对象的外周血单个核细胞(PBMC),细胞内细胞因子染色方法检测其对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异表位多肽乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg18-27的记忆性免疫应答;(2)培养慢性乙型肝炎患者DC,将负载有乙型肝炎抗原表位多肽的DC诱导特异的T细胞应答。采用细胞内细胞因子染色方法检测诱导的T细胞分泌的细胞因子,乳酸脱氢酶释放法测定诱导的T细胞杀伤活性。 

    结果  (1)急性乙型肝炎患者PBMCHBcAg 18-27 CTL特异表位多肽存在记忆的免疫应答,其分泌干扰素-γ的CD8+T细胞占CD8+T细胞总数的(4.3±2.5%,分泌白细胞介素-2的占总细胞数的(4.8±2.2%,分泌肿瘤坏死因子-α占总细胞数的(4.6±2.3%。而慢性乙型肝炎患者和健康志愿者对其记忆应答很低,与急性乙型肝炎患者比较差异有显著性,t值为2.5083.305P<0.05(2)用多肽共孵育过的慢性乙型肝炎患者DC多次诱导的T细胞慢性乙型肝炎患者组,加肽孵育的靶细胞比例为30:110:13:1时,其杀伤率分别为(57.0±20.3%、(49.5±20.2%、(21.8±12.9%,均高于对照组,表明慢性乙型肝炎患者DC可以诱导特异的T细胞活化。 

    结论  慢性乙型肝炎患者体内缺少特异记忆性T细胞;经免疫表位多肽诱导的慢性乙型肝炎患者DC可以在体外诱导效应T细胞特异性活化,从而可以杀伤特异的靶细胞,并分泌对病毒清除有重要作用的细胞因子。