北京大学人民医院肝病研究所

李若冰  陈红松  谢尧  费然  丛旭  范春蕾  王松霞  魏来  王宇

【摘要】  

    目的  探讨慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞（DC）是否诱导特异性T细胞应答。 

    方法  (1)将研究对象分为慢性乙型肝炎患者组、急性乙型肝炎痊愈组、健康志愿者组，分离各组研究对象的外周血单个核细胞(PBMC)，细胞内细胞因子染色方法检测其对细胞毒性T淋巴细胞（CTL）特异表位多肽乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）18-27的记忆性免疫应答；(2)培养慢性乙型肝炎患者DC，将负载有乙型肝炎抗原表位多肽的DC诱导特异的T细胞应答。采用细胞内细胞因子染色方法检测诱导的T细胞分泌的细胞因子，乳酸脱氢酶释放法测定诱导的T细胞杀伤活性。 

    结果  (1)急性乙型肝炎患者PBMC对HBcAg 18-27 CTL特异表位多肽存在记忆的免疫应答，其分泌干扰素-γ的CD8+T细胞占CD8+T细胞总数的（4.3±2.5）%，分泌白细胞介素-2的占总细胞数的（4.8±2.2）%，分泌肿瘤坏死因子-α占总细胞数的（4.6±2.3）%。而慢性乙型肝炎患者和健康志愿者对其记忆应答很低，与急性乙型肝炎患者比较差异有显著性，t值为2.508～3.305，P<0.05。(2)用多肽共孵育过的慢性乙型肝炎患者DC多次诱导的T细胞慢性乙型肝炎患者组，加肽孵育的靶细胞比例为30:1、10:1、3:1时，其杀伤率分别为（57.0±20.3）%、（49.5±20.2）%、（21.8±12.9）%，均高于对照组，表明慢性乙型肝炎患者DC可以诱导特异的T细胞活化。 

    结论  慢性乙型肝炎患者体内缺少特异记忆性T细胞；经免疫表位多肽诱导的慢性乙型肝炎患者DC可以在体外诱导效应T细胞特异性活化，从而可以杀伤特异的靶细胞，并分泌对病毒清除有重要作用的细胞因子。